深入浅出Layer Chromatography原理与操作指南简介

介绍

Layer chromatography(层析柱)是一种广泛应用于化学、生物学和食品科学等领域的分离技术。它通过在固体支持物上形成多个相对移动的液体层来实现样品成分的分离。这项技术不仅能够将混合物中的不同成分精确地分开,而且还能提供有关这些成分在样本中的相对含量信息。

原理

Layer chromatography基于液相色谱的一般原理,即不同的化合物具有不同的亲水性,因此它们在纸片或薄膜上的移动速度不同。在这种实验中,通常使用一块带有多个垂直排列的液体层的纸或薄膜作为支持材料。一端被浸润一个缓冲溶液,一端则是另一个缓冲溶液。然后,将待分析样品放在底部最厚的大型滴定的区域,并允许其沿着纸或薄膜向上移动到顶部最小滴定区域。

操作步骤

(a) 准备工作

首先准备好需要分析的样品,确保其质量足够大以便于观察结果。

准备两种不同浓度和pH值的小孔板或者玻璃片用于制备稀释溶剂和缓冲溶剂。

(b) 制作稀释解决方案和缓冲解决方案

将一定量水加入到小孔板上,然后用吸管吸取并倒入两个新的小孔板中。

在其中一个小孔板中加入少量氯化钠(NaCl),然后再次用吸管吸取并倒入第二个小孔板中以生成第一组稀释解决方案。

在另外的一个小孔板中加入少量硫酸铵(NH4OH)或者其他适当pH值调整试剂,然后同样进行抽取后倒入第三个小孔盘中以生成第二组稀释解决方案。

(c) 测定层析柱边缘位置

使用一次性的笔尖轻轻触摸每一条线,从下往上数起,每条线之间至少保持5厘米间距,以便容纳各自所需数量的手指压力点标记每行边缘位置。

分析过程

将预处理好的试样的极细微部分涂抹至初始点处开始放置,放置完成后立即盖好盖子,用专门设计的小刀轻轻划破第一道图形边界,同时打开盖子,使得所有手指压力点都同时按下覆盖整个图案区域,随之使前面四根手指慢慢抬起,而留下最后一根手指继续按住直至所有图案均完全干燥为止。待全部干燥后,可以观察到未经处理区与经过处理区之间颜色变化情况,从而推断出某些可能存在于未经处理区但未曾发现出的元素及含有该元素所含有的相关数据资料信息;这就是利用layer chromatography进行药物研发以及生医学科研究时常用的方法之一。

结论

Layer chromatography是一种简单且高效的实验室技术,它可以帮助科学家们快速识别、鉴定各种复杂混合物中的单独成分。此外,它也非常适合初学者,因为只需要基本设备就能开始使用,无需像高性能气质-liquid Chromatograph那样复杂昂贵。Layer chromatography已经成为许多化学实验室不可或缺的一部分,其运用范围从食品安全检测到药物开发,再到环境监测等众多领域,都展现了它巨大的潜力与应用价值。

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